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貝克曼庫爾特超速流式細(xì)胞分選系統(tǒng)有哪些應(yīng)用

點擊次數(shù):2159 更新時間:2019-03-26
      MoFlo XDP超速流式細(xì)胞分選系統(tǒng)可對復(fù)雜樣本中的細(xì)胞進行鑒定、分類、定量和分離,單次可同時對其中一種到四種特定細(xì)胞進行超高速分選純化、高通量單克隆分選或細(xì)胞芯片制備。分選后的細(xì)胞能直接用于培養(yǎng)、移植、核酸提取、單細(xì)胞PCR擴增或原位雜交等,可進一步進行細(xì)胞基因、蛋白、功能水平的研究和不同細(xì)胞之間的差異化研究。硬件中樣本細(xì)胞丟棄的比例低于5%,保證樣本中目標(biāo)細(xì)胞的高回收率,特別適用于干細(xì)胞等極低含量的細(xì)胞研究。

      MoFlo XDP可運對各種真核和原核細(xì)胞、植物細(xì)胞、微生物、浮游生物等進行檢測及分選。專為要求高產(chǎn)量、生物安全性和需要便捷的軟件分析系統(tǒng)的研究者而設(shè)計。

一.稀有細(xì)胞應(yīng)用
標(biāo)記CFSE后通過尾靜脈移植入受者小鼠體內(nèi),提取受者小鼠脾臟細(xì)胞進行移植細(xì)胞檢測??偣矙z測2293萬個細(xì)胞,發(fā)現(xiàn)移植細(xì)胞已經(jīng)進行6代增殖。R7,R8,R9分別為第5,第4,第3代移植細(xì)胞,含量分別在萬分之一左右。含量約為1/10萬的CD133陽性細(xì)胞,分選后直接注射裸鼠皮下進行成瘤實驗。

二、低含量,連續(xù)表達細(xì)胞同時進行高速四路分選

三、腫瘤干細(xì)胞檢測
    腫瘤干細(xì)胞通常缺乏特異性標(biāo)記,含量又很低,所以很難被檢測到。腫瘤干細(xì)胞和普通腫瘤細(xì)胞相比,細(xì)胞膜含有有泵動功能的ABC等蛋白家族,是腫瘤耐藥和復(fù)發(fā)的決定性因素,因此對腫瘤干細(xì)胞的研究具有重要意義。
    利用其細(xì)胞膜的泵動功能,以小分子活性染料Hoechst33342對腫瘤樣本進行平衡染色,可以檢測到因為泵出Hoechst33342而著色較少的側(cè)群細(xì)胞(SP,Side Population),此即為腫瘤干細(xì)胞。利用泵蛋白抑制劑Verapami同時染色,可以看到側(cè)群細(xì)胞比例明顯減少或全部消失,能確認(rèn)SP細(xì)胞的位置。其它干細(xì)胞,如間充質(zhì)干細(xì)胞、造血干細(xì)胞、神經(jīng)干細(xì)胞、各種成體干細(xì)胞等都可以用這種方法來進行篩選。分選出SP細(xì)胞群和非SP細(xì)胞群,可以研究基因和蛋白表達差異、致病機理、藥物篩選等生命科學(xué)的重大課題。

四、染色體/精子分析分選
    MoFlo/ MoFlo XDP高精度信號分辨能力(液流穩(wěn)定、激光/電子系統(tǒng)/PMT噪音低/運算速度快)和高活性收獲細(xì)胞(系統(tǒng)清潔度好)的功能在染色體和精子分選中得到的表現(xiàn)。對牛精子分選進行人工授精生產(chǎn)小奶牛在畜牧業(yè)上有很大的經(jīng)濟效益,MoFlo/ MoFlo XDP是可以進行這個應(yīng)用的分選流式細(xì)胞儀,在國內(nèi)有30臺MoFlo在日夜運轉(zhuǎn)進行商業(yè)分選。
    不同染色體之間的DNA含量差異很小,普通的DNA染料無法區(qū)分23對染色體。利用高功率355nm紫外激光激發(fā)的HOECHST 33258和高功率458nm激光激發(fā)的CA3分別對染色體的DNA進行染色。不同的染色體因其G-C/A-T堿基對的比例不同而被分離開,選中任何一條染色體設(shè)門后即可進行高純度分選。染色體分析分選可以應(yīng)用在高精度FISH、染色體移位、基因定位、染色體序列測定、染色體相關(guān)蛋白分析等。

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