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單細(xì)胞分選及基因組研究、外泌體或細(xì)胞外微囊泡成為熱點(diǎn)議題

點(diǎn)擊次數(shù):1878 更新時(shí)間:2017-07-13

一年一度的CYTO大會(huì)作為流式細(xì)胞學(xué)領(lǐng)域zui高水平的學(xué)術(shù)盛會(huì),今年于6月10日-14日在美國(guó)波士頓市的海因斯會(huì)展中心隆重舉行。CYTO2017是由流式細(xì)胞學(xué)會(huì) (ISAC) 舉辦的第32屆流式細(xì)胞學(xué)促進(jìn)會(huì),旨在通過各領(lǐng)域從事細(xì)胞學(xué)研究的工作者的經(jīng)驗(yàn)交流,促進(jìn)細(xì)胞學(xué)研究的共同發(fā)展。CYTO不僅有世界各地的專家學(xué)者與參會(huì)者分享流式細(xì)胞學(xué)的應(yīng)用進(jìn)展,而且各大流式技術(shù)服務(wù)供應(yīng)商也會(huì)紛紛展示的流式相關(guān)產(chǎn)品。
 


 

貝克曼庫爾特公司一直是流式細(xì)胞檢測(cè)技術(shù)的*,作為此次CYTO2017的展商,貝克曼庫爾特公司展示了6激光21色的CytoFLEX LX新型流式細(xì)胞分析儀與其他CytoFLEX系列家族的產(chǎn)品,為未來多色流式分析與微顆粒檢測(cè)等應(yīng)用提供更完善的解決方案。
 


CYTO大會(huì)的會(huì)議內(nèi)容涉及到流式細(xì)胞學(xué)應(yīng)用的方方面面,涵蓋從新技術(shù)的開發(fā)、科研進(jìn)展及臨床檢測(cè)等領(lǐng)域。在豐富多彩的會(huì)議議題中,單細(xì)胞分選及基因組研究、外泌體和細(xì)胞外囊泡是今年的熱點(diǎn)。眾多研究者都介紹了他們各自在這些領(lǐng)域的研究。


越來越多的研究者關(guān)注單細(xì)胞分選及其基因組研究是因?yàn)檠芯空J(rèn)為多細(xì)胞生物在細(xì)胞水平上內(nèi)在就具有異質(zhì)性,因此,為了真正了解生物系統(tǒng)的功能,需要進(jìn)行單細(xì)胞水平的分析。過去由于技術(shù)上的不足,完成單細(xì)胞水平的分析幾乎是不切實(shí)際的,但zui近幾年有效的單細(xì)胞分析方法已經(jīng)突破了技術(shù)瓶頸,可以將分析的分辨率從整個(gè)組織轉(zhuǎn)到個(gè)體細(xì)胞的水平,這些方法可以幫助研究者深入了解個(gè)體細(xì)胞的功能性質(zhì),進(jìn)一步了解免疫、神經(jīng)系統(tǒng)疾病以及癌癥的機(jī)理。微液流分選及流式細(xì)胞分選是目前研究者們采取的單細(xì)胞分選的主要方式。通過微液流分選系統(tǒng)可以用油滴將細(xì)胞與RNA雜合微球包裹住之后,完成細(xì)胞裂解以及反轉(zhuǎn)錄后即可進(jìn)行基因測(cè)序和分析的工作。
 


與低速并且只能進(jìn)行單一群細(xì)胞群分選的微液流分選相比,流式細(xì)胞分選可以在進(jìn)行細(xì)胞分析的同時(shí)將單細(xì)胞分選至微孔板中進(jìn)行后續(xù)基因測(cè)序的相關(guān)研究,并且MoFlo Astrios EQ等具有Index Sorting的流式細(xì)胞分選儀可以回溯單細(xì)胞所處于細(xì)胞群的具體位置,可以更有效的將蛋白表達(dá)及基因組學(xué)的信息進(jìn)行整合分析。

外泌體或細(xì)胞外微囊泡(EV)等微顆粒作為近年來的研究熱點(diǎn),自然也在CYTO大會(huì)上被頻繁提到。許多學(xué)者認(rèn)為外泌體或微囊泡是細(xì)胞與細(xì)胞間進(jìn)行長(zhǎng)距離通訊的*物質(zhì)。它們可用作不同化合物的載體,包括蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和核酸。病原體在微顆粒釋放方面表現(xiàn)突出,可以在變化過程中調(diào)節(jié)細(xì)胞通訊,特別是在操縱宿主反應(yīng)方面。外泌體或微囊泡的大小范圍在100nm至1mm之間,很難進(jìn)行檢測(cè)和鑒定。傳統(tǒng)的方法是通過差速超速離心和大小排阻色譜分離EV,再進(jìn)行后續(xù)的高分辨顯微鏡,蛋白提取或RNAseq等檢測(cè)。但也有研究者用高分辨率空氣激發(fā)流式分選儀(MoFlo Astrios EQ)進(jìn)行EV分選,MoFlo Astrios EQ的增強(qiáng)型雙前向角設(shè)計(jì)可以有效區(qū)分出噪音與100nm微小顆粒間的差異。分選后還可以用新一代的雪崩光電二極管(APD)流式比如CytoFLEX,NanoFCM進(jìn)行蛋白表達(dá)的分類分析。

貝克曼庫爾特在CYTO2017上新展出的6激光21色 CytoFLEX LX新型流式細(xì)胞分析儀采用APD作為檢測(cè)器,APD的光電轉(zhuǎn)化效率比傳統(tǒng)的PMT檢測(cè)器更高,擁有更強(qiáng)的信號(hào)級(jí)聯(lián)放大效應(yīng),因此比傳統(tǒng)檢測(cè)器更靈敏,可檢測(cè)更小、更微弱的信號(hào)。與傳統(tǒng)儀器使用488nm激光作為FS/SS信號(hào)的激發(fā)源相比,CytoFLEX LX可以選擇波長(zhǎng)更短的405nm激光作為激發(fā)源,獲得的VSSc通道的信噪比更好,特別適用于進(jìn)行小顆粒檢測(cè)。

 

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